產(chǎn)品組分
組分
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性狀
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存儲條件
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規(guī)格
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A: HAMA
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白色海綿狀
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-20℃,避光
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0.2 or 0.5 g/瓶
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B:光引發(fā)劑 LAP
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白色粉末狀
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室溫,避光
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0.025 g/瓶
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儲存及運輸
干態(tài):-20℃避光,6個月,可常溫運輸。溶液∶4℃避光,7天; -20C避光,3個月;溶液反復(fù)凍融會影響產(chǎn)品性能,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
有效日期
生產(chǎn)日期見包裝。
溶液配制
1配制0.25%(w/v)引發(fā)劑標準溶液
(1)取10 mL PBS,加入裝有引發(fā)劑LAP的棕色瓶中{(內(nèi)含0.025g LAP);2)以40-50°℃水浴加熱溶解15分鐘,期間振蕩數(shù)次;
該LAP標準液在4℃避光條件下可保存12個月。⒉配制HAMA溶液
(建議HAMA-1CK濃度為2-10 %(W/),HAMA-40OK濃度為1-3%(w/))(1)取所需質(zhì)量的HAMA放入離心管;
(2)取所需體積引發(fā)劑標準溶液加入到上述離心管中;
(3)于25-50 ℃溶解1-2 h,期間不斷攪拌/振蕩;(HAMA黏度較大,溶解時問較長)(4)將HAMA溶液使用0.22um無菌針頭過濾器滅菌。
二維細胞培養(yǎng)建議
將HAMA溶液于37℃水浴避光保溫備用(防止低溫凝膠化);立即將HAMA溶液注入孔板;
(96孔板:50~100uL/孔.48孔板: 100-3CQuL/孔. 24孔板: 300-500iL/孔)以405nm光源,輻照10-30秒使凝膠化, 可通過光照時問及強度調(diào)控凝膠強度;將培養(yǎng)基加入孔中覆蓋凝膠,置于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘,清洗樣品,吸去培養(yǎng)基;將細胞懸浮液加入到孔板中即可。根據(jù)實驗設(shè)計進行培養(yǎng)基更換、觀察拍照等操作
(操作程序無特殊要求)。
三維細胞培養(yǎng)建議
收集細胞并用37℃預(yù)熱的HAMA溶液重懸,配制細胞懸液;向孔板中加入細胞懸液;
(96 孔板:50-100uL/孔,48孔板:100~300L/孔,24孔板:300-500uL/L)以405nm光源,照射10-30秒使凝膠化,可通過光照時間及強度調(diào)控凝膠強度;提示:加入一孔固化一孔,防止細胞沉淀
>向各孔加入培養(yǎng)基,于37℃培養(yǎng)箱中5分鐘,清洗樣品,移去培養(yǎng)基;
加入新鮮培養(yǎng)基并長期培養(yǎng)。根據(jù)實驗設(shè)計進行培養(yǎng)基更換、觀察拍照、免疫熒光染色等操作〈操作程序無特殊要求)。
溫馨提示:請勿直視固化光源。
甲基丙烯酰化明膠(GelMA)由于具有生物兼容性好、可見光固化的特點,已廣泛應(yīng)用于細胞3D培養(yǎng)、組織工程、生物3D打印等研究領(lǐng)域,已有上萬篇學(xué)術(shù)論文中采用了GelMA水凝膠。團隊研制的GelMA產(chǎn)品具有批次穩(wěn)定、服務(wù)專業(yè)等優(yōu)點,自推出以來,已服務(wù)哈佛、劍橋、麻省理工、港大、清華、北大、浙大、上交等國內(nèi)外高校的數(shù)百個課題組。
1 理化性能
圖1 (a)三種型號GelMA核磁普;(b)GelMA(GM-90)光固化過程流變分析
圖2 三種型號GelMA水溶液的降溫sol-gel轉(zhuǎn)變過程,GelMA濃度分別為5 % (a)和10 % (b);及升溫gel-sol轉(zhuǎn)變過程,GelMA 濃度分別為5 % (c)和10 % (d)
圖3 三種型號GelMA的力學(xué)測試:(a) 壓縮曲線;(b) 流變曲線(GelMA濃度為10 % w/v)
2 生物相容性
GelMA已廣泛用于干細胞、癌細胞、內(nèi)皮細胞、神經(jīng)細胞等各類細胞的培養(yǎng),細胞存活率大于90%,細胞功能化良好。
圖4 骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)在GelMA表面及內(nèi)部培養(yǎng)效果
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